详细介绍:
罗氏潮霉素B作用机制:
潮霉素B是由吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)代谢产生的一种氨基糖苷类抗生素,通过抑制蛋白质合成而杀死细菌、真菌和高等真核细胞。潮霉素B通过干扰70S核糖体易位和诱导对mRNA模板的错读而抑制蛋白合成。目前常用于筛选和维持培养含潮霉素抗性基因的原核或真核细胞。
抗性基因:
对潮霉素B的抗性源自编码潮霉素B磷酸转移酶(Hph)的基因。至今发现两种来源:
Streptomyces hygroscopicus产生的Hph抗性基因;
Escherichia coli,Klebsiella pneumoniae内质粒携带的Hph抗性基因(常用);
罗氏潮霉素B生物应用:
1) 筛选和维持培养稳定转染Hph 载体的原核细胞或真核细胞(植物细胞和哺乳动物细胞);
2)由于作用模式的差异,常与G418 (GeneticinTM),Zeocin™和blasticidin S联合使用,筛选稳定转染两个不同载体的细胞株;
3)抗病毒剂,由于潮霉素B选择性渗透进入因病毒感染增强通透性的细胞,而且具有抑制翻译的功效;
4)作为驱虫药加入动物饲料;
罗氏潮霉素B应用浓度:
潮霉素B用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化。推荐使用浓度为50-1000 μg/mL,最佳浓度需要杀灭曲线来确定。
哺乳动物细胞·200-500 μg/mL;细菌/植物细胞·100-300 μg/mL;真菌·300-1000μg/mL;
罗氏潮霉素B资料出处http://www.chem17.com/st251749
http://www.wissen-bio.com/wbscell-SonList-1098137/
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